ABSTRACT
Con el objeto de aislar una fracción antigénica de Trypanosoma cruzi, más sensible para el diagnóstico de la enfermedad de chagas que las utilizadas tradicionalmente, los parásitos fueron sometidos a un proceso de solubilización parcial con Tritón X-100. La metodología involucró: 1) Recolección de epimastites cultivados en LIT modificado al comienzo de la fase estacionaria (aproximadamente 200 x 10**6 células/ml, pH 7). 2) Lavado y posterior resuspensión de las células e un medio salino libre de proteínas, 470 mOsmolar (osmolaridad 25% menor que la del medio de cultivo). 3) Acción del Tritón X-100 sobre las células a muy baja concentración (162 micronM), durante 1 h, a 4-C. Previa determinación de la relación óptima de las concentraciones de células (300 X 10**6 cél/ml) y de Tritón X-100, se constató que los parásitos liberaban al medio una cantidad aproximadamente constante de proteínas (0,42 a 0,44 mg/ml), conservando, durante todo el proceso de extracción, su movilidad y viabilidad. El método resultó sencillo, rápido y reproducible. La fracción extraída por este método (F1) fue evaluada frente a suero de 17 pacientes infectados con T. cruzi mediante las técnicas de fijación de complemento (FC'H 50) y hemaglutinación indirecta (HAI). El antígeno preparado en el Instituto de Medicina Tropical, M(PM), fue utilizado como referencia. F1 resultó ser entre cuatro y ocho veces más sensible que M(PM) por la técnica de FC'H 50; utilizando la HAI, su sensibilidad fue ocho veces mayor que la de la fracción antigénica patrón. Su análisis inmunoelectroforético evidenció que por lo menos posee cinco componentes proteicos